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Aprenda como funciona a segmentação de células e como a Visão de IA melhora a análise de microscopia com aprendizado profundo, métricas-chave, conjuntos de dados e usos no mundo real.
Muitas descobertas inovadoras na descoberta de fármacos, pesquisa do câncer ou medicina personalizada começam com um desafio fundamental: visualizar células com clareza. Os cientistas dependem de imagens nítidas para rastrear o comportamento celular, avaliar medicamentos e explorar novas terapias.
Uma única imagem de microscopia pode conter milhares de células sobrepostas, dificultando a visualização dos limites. A segmentação de células visa resolver isso, separando claramente cada célula para uma análise precisa.
Mas a segmentação de células nem sempre é simples. Um único estudo pode produzir milhares de imagens detalhadas de microscópio, muitas para serem revisadas manualmente. À medida que os conjuntos de dados crescem, os cientistas precisam de maneiras mais rápidas e confiáveis de separar e estudar as células.
De facto, muitos cientistas estão a adotar a visão computacional, um ramo da IA que permite que as máquinas interpretem e analisem informações visuais. Por exemplo, modelos como o Ultralytics YOLO11 que suportam a segmentação de instâncias podem ser treinados para separar células e até mesmo detetar estruturas subcelulares. Isso permite uma análise precisa em segundos, em vez de horas, ajudando os investigadores a dimensionar os seus estudos de forma eficiente.
Fig 1. YOLO sendo usado para segmentação de núcleos, identificando e delineando núcleos celulares (os centros das células). (Fonte)
Neste artigo, exploraremos como funciona a segmentação de células, como a visão computacional a aprimora e onde ela é aplicada no mundo real. Vamos começar!
Um olhar sobre o uso da visão computacional para segmentação celular
Tradicionalmente, os cientistas segmentavam as células à mão, traçando-as em imagens de microscopia. Isso funcionava bem para pequenos projetos, mas era lento, inconsistente e propenso a erros. Com milhares de células sobrepostas em uma única imagem, o rastreamento manual rapidamente se torna opressor e um grande gargalo.
A visão computacional oferece uma opção mais rápida e confiável. É um ramo da IA alimentado por aprendizado profundo, onde as máquinas aprendem padrões a partir de grandes conjuntos de imagens. Na pesquisa celular, isso significa que elas podem reconhecer e separar células individuais com alta precisão.
Especificamente, modelos de IA de visão como o Ultralytics YOLO11 suportam tarefas como a deteção de objetos e a segmentação de instâncias, e podem ser treinados em conjuntos de dados personalizados para analisar células. A deteção de objetos torna possível encontrar e etiquetar cada célula numa imagem, mesmo quando muitas aparecem juntas.
A segmentação de instâncias vai um passo além, desenhando limites precisos ao redor de cada célula, capturando suas formas exatas. A integração dessas capacidades de Visão de IA em pipelines de segmentação de células permite que os pesquisadores automatizem fluxos de trabalho complexos e processem imagens de microscopia de alta resolução de forma eficiente.
A evolução dos algoritmos de segmentação de células
Os métodos de segmentação celular mudaram muito ao longo dos anos. As primeiras técnicas de segmentação de imagem funcionavam para imagens simples, mas apresentavam dificuldades à medida que os conjuntos de dados aumentavam e as células se tornavam mais difíceis de distinguir.
Para superar essas limitações, abordagens mais avançadas foram desenvolvidas, levando aos modelos de visão computacional atuais que trazem velocidade, precisão e escalabilidade para estudos de microbiologia e microscopia.
Em seguida, vamos percorrer a evolução dos algoritmos de segmentação, desde os métodos básicos de thresholding até os modelos de deep learning de ponta e os pipelines híbridos.
Segmentação de células com limiarização e métodos morfológicos
Antes dos avanços na visão computacional, a segmentação de células dependia de técnicas tradicionais de processamento de imagem. Esses métodos se baseavam em regras e operações definidas manualmente, como detecção de bordas, separação do primeiro plano do fundo ou suavização de formas. Ao contrário dos modelos de visão computacional, que podem aprender padrões diretamente dos dados, o processamento de imagem depende de algoritmos fixos aplicados da mesma forma em todas as imagens.
Uma das primeiras abordagens foi o thresholding, um método que separa as células do fundo comparando os níveis de brilho dos pixels. Isso funciona bem quando há um forte contraste entre as células e o seu entorno.
Fig. 2. Um exemplo de segmentação de células baseada em limiarização. (Fonte)
Para refinar os resultados, operações morfológicas como a dilatação (expansão de formas) e a erosão (contração de formas) são usadas para suavizar arestas, remover ruídos ou fechar pequenas lacunas. Para células que se tocam ou se sobrepõem, uma técnica chamada segmentação watershed ajuda a separá-las, traçando limites onde as células se encontram.
Embora essas técnicas tenham dificuldades com casos complexos, como células sobrepostas ou imagens ruidosas, elas ainda são úteis para aplicações mais simples e são uma parte importante da história da segmentação de células. Suas limitações, no entanto, impulsionaram o campo em direção a modelos baseados em deep learning, que oferecem uma precisão muito maior para imagens mais desafiadoras.
Modelos de aprendizado profundo para segmentação de células
À medida que as técnicas de processamento de imagem atingiram os seus limites, a segmentação de células passou a adotar abordagens baseadas em aprendizagem. Ao contrário dos métodos baseados em regras, os modelos de aprendizagem profunda identificam padrões diretamente a partir dos dados, tornando-os mais adaptáveis a células sobrepostas, formas variáveis e diferentes modalidades de imagem.
As redes neurais convolucionais (CNNs) são uma classe de arquiteturas de aprendizado profundo amplamente utilizadas em visão computacional. Elas processam imagens em camadas: as primeiras camadas detectam recursos simples, como bordas e texturas, enquanto as camadas mais profundas capturam formas e estruturas mais complexas. Essa abordagem em camadas torna as CNNs eficazes para muitas tarefas visuais, desde o reconhecimento de objetos cotidianos por meio do reconhecimento de padrões até a análise de imagens biomédicas.
Modelos como o YOLO11 são construídos sobre esses princípios de aprendizado profundo. Eles estendem as arquiteturas baseadas em CNN com técnicas para detecção de objetos em tempo real e segmentação de instâncias, tornando possível localizar rapidamente as células e delinear seus limites.
Pipelines híbridos aprimoram a segmentação celular
Pipelines híbridos melhoram a segmentação celular combinando os pontos fortes de vários métodos. Estes podem incluir processamento de imagem clássico e modelos de deep learning, ou mesmo diferentes modelos baseados em deep learning trabalhando juntos.
Por exemplo, um método pode aprimorar ou pré-processar imagens de microscopia para reduzir o ruído e afiar as bordas, enquanto outro modelo é usado para detectar e segmentar as células. Ao dividir as tarefas dessa forma, as abordagens híbridas melhoram a precisão, lidam com imagens complexas de forma mais eficaz e tornam os estudos em larga escala mais confiáveis.
Fig. 3. Exemplo de uma imagem de entrada de célula de baixa qualidade (a) e os padrões que o pré-processamento extrai (b), tornando os recursos da célula mais claros para análise posterior. (Fonte)
A importância dos conjuntos de dados na segmentação celular
Outro fator chave a ser considerado na segmentação de células orientada por visão computacional são os dados de imagem. Os modelos de visão computacional dependem fortemente de conjuntos de dados grandes e de alta qualidade para aprender como identificar e separar células com precisão.
Esses conjuntos de dados normalmente consistem em imagens de microscopia emparelhadas com anotações. Tão importante quanto as imagens brutas, a anotação de dados, ou rotulagem, desempenha um papel crucial na criação de conjuntos de dados eficazes, pois informa ao modelo informações importantes.
Por exemplo, se quisermos treinar um modelo como o YOLO11 para segmentar células cancerosas de imagens de microscopia, precisamos de exemplos rotulados que mostrem onde cada célula começa e termina. Esses rótulos atuam como um guia, ensinando o modelo a reconhecer a morfologia e os limites das células. As anotações podem ser desenhadas à mão ou criadas com ferramentas semiautomáticas para economizar tempo.
O tipo de anotação também depende da tarefa. Para detecção de objetos, caixas delimitadoras são desenhadas ao redor de cada célula. Para segmentação de instâncias, os rótulos são mais como máscaras detalhadas que traçam o contorno exato de cada célula. Escolher o tipo certo de anotação e dados de treinamento ajuda o modelo a aprender o que ele precisa para o trabalho.
A complexidade dos dados relacionados à segmentação celular
Em geral, construir conjuntos de dados de visão computacional pode ser difícil, especialmente quando não existem coleções de imagens existentes ou quando o campo é muito único e especializado. Mas no campo da investigação celular, existem dificuldades técnicas que tornam a recolha e a anotação de dados ainda mais complexas.
As imagens de microscopia podem parecer muito diferentes dependendo do método de imagem celular. Por exemplo, a microscopia de fluorescência usa corantes que fazem com que partes de uma célula brilhem. Essas imagens de fluorescência destacam detalhes que, de outra forma, seriam difíceis de ver.
A anotação é outro grande desafio. Rotular milhares de células manualmente é lento e requer conhecimento especializado. As células frequentemente se sobrepõem, mudam de forma ou parecem fracas, facilitando a ocorrência de erros. Ferramentas semiautomáticas podem acelerar o processo, mas a supervisão humana geralmente é necessária para garantir a qualidade.
Para facilitar a carga de trabalho, os pesquisadores às vezes usam anotações mais simples, como marcadores de localização de interesse que indicam onde as células estão, em vez de desenhar contornos completos. Embora menos precisos, esses marcadores ainda fornecem orientação crucial para o treinamento.
Além disso, o compartilhamento de dados em biologia adiciona mais complicações. Preocupações com a privacidade, o consentimento do paciente e as diferenças nos equipamentos de imagem entre os laboratórios podem dificultar a construção de conjuntos de dados consistentes e de alta qualidade.
Apesar destes obstáculos, os conjuntos de dados de código aberto fizeram uma grande diferença. As coleções públicas partilhadas através de plataformas como o GitHub fornecem milhares de imagens rotuladas em muitos tipos de células e métodos de imagem, ajudando os modelos a generalizar melhor para cenários do mundo real.
Aplicações de modelos de segmentação celular
Agora que temos uma melhor compreensão dos dados e métodos usados para segmentar células com visão computacional, vamos examinar algumas das aplicações no mundo real da segmentação de células e da visão computacional.
Análise de célula única usando segmentação celular
A análise de célula única ou o estudo de células individuais em vez de amostras de tecido inteiras ajuda os cientistas a ver detalhes que geralmente são perdidos em um nível mais amplo. Essa abordagem é amplamente utilizada em biologia celular, descoberta de medicamentos e diagnósticos para entender como as células funcionam e respondem sob diferentes condições.
Por exemplo, na pesquisa do câncer, uma amostra de tecido geralmente contém uma mistura de células cancerosas, células imunológicas e células de suporte (estromais). Olhar apenas para o tecido como um todo pode esconder diferenças importantes, como a forma como as células imunológicas interagem com os tumores ou como as células cancerosas perto dos vasos sanguíneos se comportam.
A análise de célula única permite que os pesquisadores separem esses tipos de células e os estudem individualmente, o que é crucial para entender as respostas ao tratamento e a progressão da doença. Modelos como o YOLO11, que suportam segmentação de instâncias, podem detectar cada célula e delinear sua forma exata, mesmo em imagens lotadas ou sobrepostas. Ao transformar imagens de microscopia complexas em dados estruturados, o YOLO11 permite que os pesquisadores analisem milhares de células de forma rápida e consistente.
Rastreamento de células e imagem ao vivo com YOLO
As células se dividem, movem e respondem ao ambiente de maneiras diferentes. Analisar como as células vivas mudam ao longo do tempo ajuda os cientistas a entender como elas se comportam em condições de saúde e doença.
Com ferramentas como o contraste de fase ou a microscopia de alta resolução, os investigadores podem acompanhar estas alterações sem adicionar corantes ou etiquetas. Isto mantém as células no seu estado natural e torna os resultados mais fiáveis.
Rastrear células ao longo do tempo também ajuda a capturar detalhes que poderiam ser perdidos. Uma célula pode mover-se mais rápido do que outras, dividir-se de uma forma incomum ou responder fortemente a um estímulo. Registar estas diferenças subtis fornece uma imagem mais clara de como as células se comportam em condições reais.
Modelos de visão computacional como o Ultralytics YOLOv8 tornam este processo mais rápido e consistente. Ao detectar e rastrear células individuais em sequências de imagens, o YOLOv8 pode monitorar os movimentos, divisões e interações das células automaticamente, mesmo quando as células se sobrepõem ou mudam de forma.
Fig 4. Resultados da segmentação do YOLOv8 sendo usado para detecção de células. (Fonte)
Integrando Visão de IA com bioinformática e multi-ômica
Os insights de modelos de visão computacional como o YOLO11, usados para segmentação de células inteiras, podem ter um impacto maior quando combinados com bioinformática (o uso de métodos computacionais para analisar dados biológicos) e multi-ômica (a integração de informações de DNA, RNA e proteínas). Juntos, esses métodos levam a pesquisa além do desenho dos limites celulares e para a compreensão do que esses limites significam.
Em vez de apenas identificar onde as células estão, os cientistas podem estudar como elas interagem, como a estrutura do tecido muda na doença e como pequenas mudanças na forma da célula se conectam à atividade molecular.
Considere uma amostra de tumor: ao ligar o tamanho, a forma ou a posição das células cancerígenas com os seus perfis moleculares, os investigadores podem encontrar correlações com mutações genéticas, expressão genética ou atividade proteica anormal. Isto transforma imagens estáticas em insights práticos, ajudando a rastrear a atividade genética em tumores, a mapear o comportamento das proteínas em tempo real e a construir atlas de referência que conectam a estrutura com a função.
Benefícios da segmentação celular
Aqui estão alguns dos principais benefícios de usar a visão computacional para a segmentação de células:
Triagem de alto rendimento: A segmentação automatizada pode processar milhões de células de forma eficiente, acelerando a descoberta e os testes de medicamentos em larga escala.
Insights sobre a organização espacial: Mostra como as células estão dispostas dentro dos tecidos, fornecendo pistas críticas sobre os ambientes tumorais ou como os tecidos se desenvolvem.
Geração de dados quantitativos: Além de insights visuais de imagens celulares, a segmentação fornece informações mensuráveis, como contagens de células, áreas e níveis de intensidade, permitindo comparações confiáveis entre experimentos.
Limitações do uso de Visão de IA para segmentação de células
Embora a visão computacional traga muitos benefícios para a segmentação de células, ela também tem algumas limitações. Aqui estão alguns fatores a serem considerados:
Privacidade de dados: Compartilhar conjuntos de dados de células anotados para treinamento de modelos pode levantar preocupações éticas e regulatórias, especialmente quando informações do paciente estão vinculadas às imagens.
Hardware e demandas computacionais: A análise de bioimagens de alta resolução requer GPUs e armazenamento robustos. A computação em nuvem e algoritmos otimizados estão ajudando a tornar isso mais acessível.
Generalização do modelo: Modelos treinados no microscópio de um laboratório ou protocolo de coloração podem não ter um bom desempenho em outros lugares. O treinamento com conjuntos de dados diversos e de vários laboratórios melhora a robustez.
O futuro da segmentação de células
A próxima geração de segmentação de células provavelmente será definida por modelos de visão computacional que combinam velocidade, precisão e escalabilidade. Modelos como o U-Net têm sido altamente influentes, mas podem ser computacionalmente exigentes. Com os avanços na visão computacional, os pesquisadores estão migrando para modelos que oferecem alta precisão e desempenho em tempo real.
Por exemplo, modelos de ponta como o Ultralytics YOLOv8 podem segmentar imagens de microscopia muito mais rapidamente do que as abordagens tradicionais, ao mesmo tempo que produzem limites nítidos e precisos.
Em um estudo recente de Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM), as métricas de desempenho mostraram que o YOLOv8 rodou até 43 vezes mais rápido que o U-Net. Esse tipo de desempenho torna possível analisar grandes conjuntos de dados em tempo real, o que é cada vez mais importante à medida que os estudos de imagem aumentam de tamanho.
Fig 5. Comparado com outros modelos como o U-Net (c), a utilização do YOLOv8 para segmentação (d) produz contornos mais nítidos e precisos em imagens de microscopia. (Fonte)
Essas melhorias já estão sendo colocadas em prática. Plataformas como o Theiascope™ da Theia Scientific integram modelos Ultralytics YOLO com Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM), permitindo que estruturas em nanoescala sejam segmentadas de forma consistente e em escala. A plataforma usa modelos Ultralytics YOLO para detecção e segmentação em tempo real, identificando automaticamente estruturas em imagens TEM conforme são capturadas e convertendo-as em dados confiáveis e prontos para análise.
Principais conclusões
A segmentação de células desempenha um papel fundamental na microscopia moderna e na pesquisa biomédica. Permite que os cientistas observem células individuais, rastreiem a progressão de doenças e monitorem como os tratamentos afetam o comportamento celular. Modelos de Visão de IA como o YOLO11 tornam este processo mais rápido e preciso. Ao lidar com imagens grandes e complexas com facilidade, eles garantem que os experimentos sejam repetíveis e escaláveis.